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      成年小鼠關節軟骨細胞原代培養

      成年小鼠關節軟骨細胞原代培養

      簡要描述:
      成年小鼠關節軟骨細胞原代培養是伊萊博生物的服務項目之一,由經驗豐富的實驗人員操作完成。

      更新時間:2024-03-22

      訪問量:1476

      廠商性質:其他

      1. C57小鼠,8-10周,通過頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉移到通風柜中的解剖盤中。

      2. 使用ykj和nz,使髖關節脫臼,保持股骨頭完整。

      3. 用zxq去除每個股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。

      4. 用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關節軟骨小心移到2ml離心管中。

      5. 用ykj將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預熱的Collagenase D1.5mg/ml)。

      6. 放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化,時間2h 。

      7. 第一次消化結束后,加入含血清的培養基終止消化,40um的細胞篩過濾后,離心1500rpm,2min。

      8. 沉淀用DMEMwq培養基重懸,計數,種植在24孔板中。

      9. 在未消化的組織中加入3ml預熱的Collagenase D,放入37℃、80rpm的搖床中進行第二次消化,時間2h,然后收集細胞。


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