糖尿病視網(wǎng)膜病變視模型構(gòu)建

糖尿病視網(wǎng)膜病變模型來(lái)源

鏈脲佐菌素（STZ）導(dǎo)致糖尿病，并誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變

模式動(dòng)物品系：SPF 級(jí)SD大鼠，雄性，8 周

實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組

實(shí)驗(yàn)周期：8~10 weeks

糖尿病視網(wǎng)膜病變模型建模方法

適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行建模。糖尿病組建模前禁食16h，稱重空腹體重，尾靜脈取血測(cè)定血糖濃度，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ（65mg/kg），72h、96h、120h后應(yīng)用穩(wěn)步血糖測(cè)定儀檢測(cè)隨機(jī)血糖，測(cè)定體重，觀察一般情況如體型及毛發(fā)顏色變化。每組取尾靜脈血測(cè)量血糖，連續(xù)3次血糖≥16.7mmol/L，并出現(xiàn)典型的“三多一少"癥狀者，即可確定為糖尿病小鼠。

健康對(duì)照組將STZ改為等體積生理鹽水，其它步驟相同。

取材：造模后6周處死，取左眼及右眼視網(wǎng)膜。

制備視網(wǎng)膜消化鋪片：大鼠麻醉后斷頭處死，取眼球，4%多聚甲醛固定24~48h，自睫狀體后部近鋸齒緣剪開(kāi)鞏膜，去掉眼晶狀體和玻璃體，將眼后段平均分成3份， 在水中輕輕漂取視網(wǎng)膜；清水漂洗2~3h。將視網(wǎng)膜放人用3%胰蛋白mei消化溶液中，在37°C恒溫箱中孵育2~3h，將視網(wǎng)膜輕輕移人蒸餾水中，輕輕吹打，使殘余的視網(wǎng)膜神經(jīng)成分及內(nèi)界膜全脫去，剩下一層透明的視網(wǎng)膜血管網(wǎng)，移到載坡片上盡量鋪平，自然干燥。