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      脾單核細胞分離實驗

      脾單核細胞分離實驗

      簡要描述:
      脾單核細胞分離實驗是伊萊博生物細胞的基礎服務項目之一,由專業的實驗技術人員操作完成。

      更新時間:2026-03-20

      訪問量:1719

      廠商性質:其他

      脾單核細胞分離實驗操作方法:

      采用頸椎脫臼法處死小鼠,于75%的酒精中浸泡10-15min;
      在無菌超凈臺內分離脾臟,放入PBS溶液(按照1:50的比例加入雙抗)中清洗2遍;
      將清洗后的脾臟組織轉移至離心管中,加入適量的RMPI-1640培養基,用剪刀將其剪碎成糜狀;
      將剪碎后的組織經200目的濾網過濾,得到脾細胞懸液;
      另取一個離心管,先加入與細胞懸液等量體積的淋巴細胞分離液,之后將細胞懸液輕輕加到離心管的淋巴細胞分離液上層(注意45度傾斜沿管壁滴加,一定要緩慢否則懸液沉下去導致分層界面不明顯);
      3000rpm離心10min,離心完畢后吸取中間白膜層即為脾單個核細胞;
      3000rpm離心10min,加入RMPI-1640培養基進行洗滌一次;
      用紅細胞裂解液去除紅細胞;3000rpm離心10min,再次用RMPI-1640培養基進行洗滌一次;
      洗滌結束后,所得細胞沉淀用RMPI-1640培養基重懸后進行細胞計數。


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