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      細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)

      細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)

      簡要描述:
      細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)室通過檢測兩個(gè)細(xì)胞分開,或者是將細(xì)胞從基質(zhì)上移開所需的力量,推算細(xì)胞的粘附性

      更新時(shí)間:2026-03-20

      訪問量:2011

      廠商性質(zhì):其他

      細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)(組織→單細(xì)胞懸液)

      用途:從組織(血管、肝臟、腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、血液)中分離出活的單細(xì)胞,用于流式、培養(yǎng)、分選。

      一、試劑耗材

      • PBS(預(yù)冷)

      • 組z消化液:膠原酶 II / IV(常用 0.1%–0.2%)

        或 膠原酶 + 胰m混合消化液

      • 細(xì)胞篩網(wǎng):70 μm 或 40 μm

      • 離心管、培養(yǎng)皿、剪刀、鑷子

      • 含血清培養(yǎng)基(終止消化)

      二、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程

      1. 取材

      1. 無菌條件下取出組織。

      2. 冷 PBS沖洗,洗掉血污、脂肪、結(jié)締組織。

      3. 剪成 1 mm3 左右小碎塊

      2. 消化(最關(guān)鍵)

      把碎組織轉(zhuǎn)入離心管,加入預(yù)熱消化液
      放入 37℃水浴 消化:
      • 一般組織:30–60 min

      • 疏松組織:20 min

      • 致密組織(斑塊、動(dòng)脈):1–2 h

      期間每隔 5–10 分鐘 輕輕吹打 / 顛倒 一次。

      3. 終止消化

      加入2–3 倍體積 含 10% 血清的完q培養(yǎng)基,終止消化(血清抑制酶)。

      4. 過濾去殘?jiān)?/h2>
      用吸管輕輕吹打后,過 70 μm 細(xì)胞篩
      去掉未消化的組織塊,只留單細(xì)胞懸液。

      5. 離心

      • 轉(zhuǎn)速:1000 rpm(≈6000 g)

      • 時(shí)間:5–8 min

        棄上清。

      6. 重懸 & 計(jì)數(shù)



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