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細(xì)胞分選服務(wù)
簡要描述：
細(xì)胞分選服務(wù)是指據(jù)細(xì)胞的屬性，講混合的細(xì)胞分為不同特性的幾個不同類群的方法，本公司運用的是免疫磁珠細(xì)胞分選
更新時間：2026-03-20
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廠商性質(zhì)：其他
一、實驗步驟
1. 制備單細(xì)胞懸液
消化貼壁細(xì)胞 / 處理組織，充分吹打成單細(xì)胞。
40~70 μm 濾網(wǎng)過濾，去除團(tuán)塊（防止堵針）。
離心棄上清，用分選緩沖液重懸。
2. 細(xì)胞計數(shù)與濃度調(diào)整
濃度：1×10?~1×10? /mL
體積：根據(jù)分選量一般 100~500 μL / 管
3. 設(shè)對照管（必須！）
每組必須設(shè)：
未染色細(xì)胞管（調(diào)電壓）
單陽性對照管（調(diào)節(jié)補償）
同型對照管（排除非特異性結(jié)合）
4. 抗體染色
細(xì)胞懸液中加入熒光抗體，避光孵育：
室溫：20~30 min
或 4℃：30 min
加分選緩沖液洗滌，離心去上清。
重懸，再次過篩，上機。
5. 活死染色（可選）
上機前加入 7-AAD 或 PI，排除死細(xì)胞。
6. 上機分選
先跑未染色、單染管，調(diào)電壓、調(diào)補償。
圈選目的細(xì)胞群：
FSC/SSC 圈活細(xì)胞
去黏連、去碎片
根據(jù)熒光圈目標(biāo)群
接收管預(yù)先加入完q培養(yǎng)基 / 血清（保護(hù)細(xì)胞）。
選擇分選模式：
純度優(yōu)先（Purity）
富集模式（Enrich）
單細(xì)胞模式（Single cell）
7. 分選后處理
分選后離心，重懸培養(yǎng) / 提取蛋白 / RNA。
可復(fù)檢流式，檢測分選純度
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